INCA BIOTEC desarrolla herramientas de diagnóstico molecular de agentes patógenos en el cultivo de moluscos bivalvos

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TUMBES, Perú.- Por décadas, el cultivo de moluscos a nivel mundial se ha visto mermado por numerosas enfermedades infecciosas de fuerte impacto productivo-económico que amenazan el desarrollo y la sostenibilidad de esta actividad. Históricamente, las medidas sanitarias fueron implementadas en los cultivos de moluscos después de los brotes infecciosos, es decir cuando los patógenos ya se habían dispersado y establecido de forma endémica en el medio dificultando las operaciones de prevención y control

En efecto, la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE) recomienda establecer centros de investigación para la prevención y control de enfermedades de animales acuáticos cultivados preservar las inversiones privadas y la biodiversidad y evitar crisis epidemiológicas graves como las fueron las del virus de la mancha blanca en el langostino y la del ISA en el Salmon chileno.

El Perú, a pesar del impresionante crecimiento de la acuicultura liderado por el cultivo de concha de abanico (Argopecten purpuratus) carece de centros de investigación especializados en moluscos.

En este contexto, la empresa de biotecnología acuícola INCA´BIOTEC, dedicada a la patología, inmunología y genética de especies acuáticas, conjuntamente con la Universidad Nacional de Tumbes (UNT) ha desarrollado herramientas modernas de diagnóstico molecular de agentes patógenos para el monitoreo de la sanidad acuícola en el cultivo de moluscos.

Este trabajo fue conducido como parte del proyecto  “Desarrollo de nuevos kits de diagnóstico molecular de tipo PCR (nested-PCR) para la detección de Rickettsias, Herpesvirus e Iridovirus en los moluscos; Concha de abanico (Argopecten purpuratus), ostra del pacifico (Crassostrea gigas) y chanque (Concholepas concholepas)”  (157-FINCyT-FIDECOM-PIPEI-2010).

El proyecto condujo al desarrollo de kits de diagnóstico molecular de tipo PCR, nested-PCR y PCR en tiempo real para la detección de los principales patógenos que afectan los cultivos de moluscos en el mundo como son los Herpesvirus, Iridovirus y Rickettsias. Los kits obtenidos incluyen protocolos y reactivos de conservación de tejidos, extracción de ADN, amplificación de regiones de ADN conservadas de Herpesvirus, Iridovirus y Rickettsias utilizando sondas moleculares especificas.

La aplicación de estos kits en un monitoreo realizado con el ITP-SANIPES, a partir de moluscos colectados en los principales centros de producción, reveló la presencia de un patógeno relacionado a Herpesvirus en los cultivos de concha de abanico de los departamentos de Piura, Ancash, Lima, e Ica con prevalencias que oscilan entre el 4 y el 6% en animales asintomáticos.

En efecto, los análisis de secuencia de los amplicones obtenidos mostraron que el agente encontrado está estrechamente relacionado con herpesvirus patógenos de moluscos como el “OsHV1”, Oyster Herpesvirus type 1 que afecta a las larvas y juveniles de la ostra japonesa Crassostrea gigas en diferentes partes del mundo, y con el Acute Viral Necrosis Virus (AVNV) que afecta a los cultivos de vieiras adultas de Chlamys farreri en asía.

Los Herpesvirus de moluscos bivalvos son conocidos por afectar un largo espectro de huéspedes, especialmente, las ostras (Ostreidae): Crassostrea virginica, C. gigas, Ostrea edulis O. angasi, Tiostrea chilensis así como en Veneridae y Pectinidae: Pecten maximus en Francia y Chlamys farreri, Patinopecten yessoensis y Chlamys nobilis en China.  Las causas biológicas del riesgo de epidemia viral están directamente relacionadas con la biología y epidemiologia de los herpesvirus, en particular de sus modalidades de transmisión vertical (padres a hijos) y horizontal, intra- e inter-específicas. Las larvas infectadas verticalmente mueren precozmente infectando, por transmisión horizontal, a las larvas vecinas, lo que causa mortalidades masivas en los bancos naturales o en los laboratorios. Los animales infectados por esta vía, más tardíamente, van a ser medianamente afectados por el virus, transformándose eventualmente en reproductores portadores asintomáticos y transmisores de virus. En algunas especies, como la viera Chlamys farreri, las mortalidades asociadas a cambios de temperaturas provocan severas pérdidas en estadios adultos.

La disponibilidad de estos kits de diagnóstico permitirá, por una parte, establecer si este virus es patógeno y está relacionado con los problemas recientes de mortalidades reportados en diversas regiones del país, y bajo qué condiciones ambientales se expresa su virulencia.

Por otra parte, los kits permitirán iniciar programas de prevención y control de enfermedades, y mejoramiento genético, al igual que lo realizado por INCA´BIOTEC en otras especies como el langostino. Esta estrategia consiste en la certificación de reproductores exentos del virus por PCR para la producción de semilla libre de Herpesvirus con miras a prevenir el riesgo de epidemia en los cultivos. En paralelo las operaciones de mejoramiento genético se basarán, por una parte, en la obtención de individuos resistentes al virus a través de infecciones experimentales y, por otra parte,  en el uso de reproductores con superioridad inmunitaria al nivel de la defensa antiviral que corresponde al sistema ARN de interferencia. La heredabilidad de estos genes permitirá establecer familias y líneas puras resistentes a Herpesvirus asegurando la sostenibilidad del sector productivo a largo plazo.